新蒲萄京网站

新型冠状病毒核酸检测引物和探针序列(Specific primers and probes for detection 2019 novel coronavirus)

来源:新蒲萄京网站 发布时间:2020-01-21

  1.新型冠状病毒核酸测定(实时荧光RT-PCR方法) 

  推荐选用针对新型冠状病毒的开放读码框1abopen reading frame,ORF1ab)、核壳蛋白(nucleoproteinN)基因区域的引物和探针。 

  Target 1ORF1ab: 

  正向引物(F):CCCTGTGGGTTTTACACTTAA 

  反向引物(R):ACGATTGTGCATCAGCTGA 

  荧光探针(P):5'-FAM-CCGTCTGCGGTATGTGGAAAGGTTATGG-BHQ1-3' 

  Target 2N: 

  正向引物(F):GGGGAACTTCTCCTGCTAGAAT 

  反向引物(R):CAGACATTTTGCTCTCAAGCTG 

  荧光探针(P):5'-FAM-TTGCTGCTGCTTGACAGATT-TAMRA-3' 

  可以核酸提取和实时荧光RT-PCR反应体系参考相关厂家试剂盒说明。 

  2.结果判断 

  阴性:Ct值或Ct40 

  阳性:Ct<37,可报告为阳性。 

  可疑:Ct值在37-40之间,建议重复实验,若重做结果Ct<40,扩增曲线有明显起峰,该样本判断为阳性,否则为阴性。